1 材料與試劑
1.1 實驗動物
ICR 小鼠,雄性,18.0~22.0 g,6月齡。購于長春億斯實 驗動物技術有限公司,許可證號:SCXK(吉)-2015-0001。
1.2 材料
云芝材料采自吉林省延邊州汪清縣林區,經吉林 農業大學宋慧教授鑒定為多孔菌科彩絨革蓋菌 (C.versicolor Quel)的干燥子實體。 云芝浸膏(Coriolus versicolor extract, CVE)由本 實驗室提取完成,提取過程為將 700.0 g 云芝清洗干 凈,加入 12 倍量的蒸餾水,蒸煮 3.0 h;第 2 次再加入 10 倍量蒸餾水,繼續蒸煮 3.0 h。所得浸膏即為試驗所 需藥物,試驗時,用生理鹽水將其稀釋為所需濃度。
1.3 儀器與設備
TGL-16 K 型離心機(湖南湘儀離心機廠);HH-4 型恒溫水浴鍋(常州澳華儀器公司);FA 1004 B 型電 子天平、YP 5002 型電子天平(上海越平科學儀器有限 公司);BioTek-Epoch 型酶標儀(美國 BioTek 公司); SK 5200 H型超聲波清洗器(上海科導超聲儀器有限公司);LEICA EG 1150 H 型包埋機、LEICA RM 2255 型 切片機(德國徠卡公司);KD-T 型攤片機(浙江省科迪 儀器設備有限公司);Coyote-Bio G 200 型組織勻漿破 碎儀(卡尤迪生物科技);OLYMPUS BX 53 型光學顯 微鏡〔奧林巴斯(中國)有限公司〕。
2 方法
保持動物飼養室溫度為 25 ± 2 ℃,自由飲食。隔 日稱重,根據體重調整給藥量,劑量為10 mL(/ kg·d), 周期 30 d,末次給藥后,禁食不禁水 16 h。陰性對照組 灌胃花生油,其余各組均灌胃 1% CCl4 花生油溶液建 立肝損傷模型,劑量為 5 mL/kg,2 h 后解剖。摘眼 球取血待測血清相關指標;脫頸處死,取肝左葉,固定, 待做病理學研究,取肝右葉置于液氮內,待測肝組織相 關指標。
3 討論與結論
通過觀察肝組織病理切片可得模型組肝細胞出現 大量溶解、脫落現象,而研究結果表明,CVE 能改善 CCl4 造成的肝細胞脫落、溶解,以及脂肪變性,這與孫卉等開展的云芝多糖保肝效果所得結論一致。在 前期開展云芝提取物對小鼠酒精肝損傷的保護作用研 究中發現CVE能明顯改善肝功能及病理病變。
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