1 實(shí) 驗(yàn) 

1. 1 儀器設(shè)備與試劑

夏枯草，哈爾濱信衡中藥材有限公司。 數(shù)顯恒溫水浴鍋，上海力辰邦西儀器科技有限公司; 數(shù)控 超聲波清洗器，上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司; 循環(huán)水多用真空泵，邦西儀器科技( 上海) 有限公司; 紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，北 京普析通用儀器有限責(zé)任公司。 實(shí)驗(yàn)所用試劑: 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品，上海源葉生物科技有限公 司; 亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉等均為分析純，無(wú)錫市亞泰 聯(lián)合化工有限公司。

1. 2 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制及樣品總黃酮含量測(cè)定

精密量取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品 10 mg，用 65% 乙醇定容至 100 mL 容 量瓶中，搖勻，備用。分別精確吸取 0，1. 0，2. 0，4. 0，6. 0 和 8. 0 mL 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液，依次放入 1 至 6 號(hào) 25 mL 容量瓶中， 而后加入 0. 8 mL 5% NaNO2 溶液，搖勻后放置 6 min，加入 0. 8 mL 10% Al( NO3 ) 3 溶液，搖勻后放置 6 min，再加入 10 mL 4% NaOH 溶液，用 65% 乙醇定容至刻度，放置 15 min 后于 510 nm 處測(cè)定其吸光度。以蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液的質(zhì)量濃度( C) 為 橫坐標(biāo)，吸光度( A) 為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)?；貧w方程為: A = 8. 343C+0. 0122，Ｒ = 0. 9999。

1.3 提取方法的確定

稱(chēng)取夏枯草 2. 0 g，加入40 mL 65% 乙醇，室溫下浸漬 2 h， 過(guò)濾。共提取 2 次后，合并濾液，定容至 100 mL，備用。稱(chēng)取夏枯草 2. 0 g，加入 40 mL 65% 乙醇，水浴回流 1. 5 h， 過(guò)濾。共提取 2 次后，合并濾液，定容至 100 mL，備用。稱(chēng)取夏枯草 2. 0 g，加入 40 mL 65% 乙醇，超聲提取 40 min， 過(guò)濾。共提取 2 次后，合并濾液，定容至 100 mL，備用。提取率達(dá)到最高為 5. 83% ，乙醇體積分?jǐn)?shù)繼續(xù)提高，夏枯 草總黃酮提取率反而開(kāi)始逐漸下降。分析其原因可能因?yàn)橐掖? 濃度過(guò)高會(huì)溶出較多的脂溶性雜質(zhì)及親脂性強(qiáng)的成分，其與總 黃酮競(jìng)爭(zhēng)乙醇溶劑，間接地減少了總黃酮的溶出量，使得提取 率下降。因此選取最優(yōu)乙醇體積分?jǐn)?shù)為 55% 。

2 結(jié)果與討論

在提取溶劑同為 65% 乙醇，料液比均為 1∶20 的前提下， 3 種提取方法醇浸漬提取法、醇溶劑回流提取法、超聲輔助醇提 取法對(duì)夏枯草總黃酮的提取率分別為 4. 22% 、5. 34% 、5. 96% 。 結(jié)果表明超聲輔助醇提取法對(duì)夏枯草總黃酮的提取率最高，因 此繼續(xù)對(duì)該提取方法進(jìn)行單因素及正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化工藝條件。當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)在 35% ～ 55% 范圍內(nèi)時(shí)，夏枯草總黃酮提 取率隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的升高而增加，當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)為 55%時(shí)，提取率達(dá)到最高為 5. 83% ，乙醇體積分?jǐn)?shù)繼續(xù)提高，夏枯 草總黃酮提取率反而開(kāi)始逐漸下降。

3 結(jié) 論 

綜合比較了醇浸漬提取法、醇溶劑回流提取法、超聲輔助醇提取法對(duì)夏枯草總黃酮提取率的影響，結(jié)果表明超聲 輔助醇提取法對(duì)夏枯草總黃酮的提取率最高，并通過(guò)單因素實(shí) 驗(yàn)及正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)選出該提取法的最佳工藝條件: 乙醇體積分?jǐn)?shù) 為 65% 、提取時(shí)間為 20 min、料液比為 1∶20，在此條件下， 夏枯草總黃酮提取率為 7. 01% ，本研究為夏枯草總黃酮的提取 及開(kāi)發(fā)利用提供了理論依據(jù)。

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